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Tipo de material : bachelorThesis
Título : Identificación de biovares de ralstonia solanacearum mediante pruebas bioquímicas y moleculares a partir de aislados obtenidos de Musa spp.
Autor : Jácome Díaz, Tatiana Karina
Tutor : Idrovo Espín, Fabio Marcelo
Palabras clave : BIOQUÍMICA;ECOLOGÍA;BACTERIAS;BIOTECNOLOGÍA
Fecha de publicación : 2018
Editorial : Quito: Universidad de las Américas, 2018
Citación : Jácome Díaz, T. K. (2018). Identificación de biovares de ralstonia solanacearum mediante pruebas bioquímicas y moleculares a partir de aislados obtenidos de musa spp (Tesis de pregrado). Universidad de las Américas, Quito.
Resumen : La bacteria Ralstonia solanacearum es considerada de alta agresividad, provoca la enfermedad del moko que conduce a la muerte repentina de Musáceas y otro tipo de cultivos. La infección ha llegado a varios países en Latinoamérica, entre los cuales se reportó la posible introducción de esta bacteria al Ecuador desde Colombia; país que tenía poco o nulo conocimiento sobre esta bacteria, motivo por el cual aumentó el interés de su estudio para conocer a que provincias se ha dispersado y lograr establecer en futuros estudios la ecología y epidemiología de la misma. Para el aislamiento de la bacteria se utilizó el Medio Semiselectivo Sur África (SMSA) que identifica las características de las colonias bacterianas y su posterior purificación fue realizada mediante el medio Agar Nutritivo. Conjuntamente se comparó la detección de la bacteria con la técnica DAS-ELISA y el sistema de identificación microbiológica (Biolog Inc), en el que se determinó los componentes bioquímicos; además se realizó la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para posteriormente identificar biovares por medio de pruebas metabólicas. Se evaluaron 80 muestras provenientes de fruto y pseudotallo de distintas variedades de banano provenientes de diferentes provincias del país que fueron proporcionados por la Agencia Ecuatoriana de Aseguramiento de la Calidad del Agro (AGROCALIDAD). El medio SMSA permitió detectar colonias de R solanacearum y el sistema de identificación microbiológica Biolog detectó bacterias antagónicas. La técnica DAS-ELISA permitió detectar R solanacearum y evaluar la cantidad de inóculo a concentraciones mayores de 108 UFCmL. Con la técnica PCR se confirmó la bacteria y mediante resultados positivos se identificó biovares por medio de la degradación de disacáridos (celobiosa, lactosa y maltosa) y oxidación de polialcoholes (dulcitol, sorbitol y manitol); con lo cual se obtuvo tres tipos de biovares: biovar 1 en la provincia del Guayas, biovar 2 en Manabí y Guayas y biovar 3 en Manabí, Sucumbíos y Napo.
Descripción : The bacterium Ralstonia solanacearum is considered to be highly aggressive, causing disease of moko that leads to the sudden death of Musaceae and other crops. The infection has reached several countries in Latin America, among which the possible introduction of this bacterium to Ecuador from Colombia was reported; country that had little knowledge about this bacterium, which is why it increased the interest of its study to know to which provinces it has dispersed and achieve in future studies the ecology and epidemiology of it. For the isolation of the bacteria, the South Africa Semi-selective Medium (SMSA) was used, which identifies the characteristics of the bacterial colonies and their subsequent purification was carried out through the Nutritive Agar medium. Together, the detection of the bacteria was compared with the DAS-ELISA technique and the microbiological identification system (Biolog Inc.), in which the biochemical components were determined; in addition, the polymerase chain reaction (PCR) was performed to subsequently identify biovars by means of metabolic tests. Were evaluated 80 samples of fruit and pseudostem of different varieties of banana from different provinces of the country that were provided by the Ecuadorian Agency for Quality Assurance of Agro (AGROCALIDAD). The SMSA medium allows detecting colonies of R solanacearum and the microbiological identification system Biolog detected antagonistic bacteria. The DAS-ELISA technique detected R solanacearum and evaluated the inoculum quantity to more than 108UFC/mL. With the PCR technique the bacterium is confirmed and through the positive results it was identified by the degradation of disaccharides (cellobiose, lactose and maltose) and oxidation of polyalcohols (dulcitol, sorbitol and mannitol); with which three types of biovars were obtained: biovar 1 in the province of Guayas, biovar 2 in Manabí and Guayas and biovar 3 in Manabí, Sucumbíos and Napo.
URI : http://dspace.udla.edu.ec/handle/33000/10590
Aparece en las colecciones: Ingeniería en Biotecnología

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